VN25 - Eneo

EFICIENCIA 50 Como referencia para comparar la composición fenólica en este estudio se ha utilizado el clon de Tempranillo RJ43, uno de los clones más utilizados en la DOCa. Rioja (España), cultivado en la misma parcela que VN21 y en las mismas condiciones ambientales. El muestreo se llevó a cabo mediante la recogida de racimos maduros (17/09/2019). Se seleccionaron las uvas para el análisis de compuestos fenólicos en hollejo y en semilla. En paralelo se recogieron 75 kg aproxi- madamente de uva que se dividieron en 3 lotes para proceder a su vinifi- cación en la Bodega Experimental del Instituto de Ciencias de la Vid y del Vino (ICVV). Medidas de intensidad de color El color de las uvas y de los vinos se caracterizó con los parámetros colori- métricos en el espacio tridimensional CIELAB (L*a*b*) con un colorímetro CR-400 (Konica Minolta) para las uvas y un espectrofotómetro Agilent Cary 60 UV-Vis para el vino. Elaboración del vino La vinificación de los dos clones se realizó el mismo día de la vendimia, por triplicado para cada clon. Los raci- mos se despalillaron y los mostos se fermentaron con la adición de un 8% de metabisulfito potásico, y 20 g/hL de levadura Uvaferm VRB (Lallemand). La fermentación alcohólica se realizó a 20 °C durante nueve días, controlando su evolución mediante medida de la densidad del mosto. Tras el prensado, el vino reposó (20 °C) durante siete días. A continuación, la fermentación maloláctica se realizó a 20 °C con la inoculación de 1 g/hL de la bacteria comercial Oenococcus oeni cepa 203 LalvinSilka (Lallemand). La evolución de la fermentación maloláctica se comprobó mediante el análisis enzi- mático de la relación glucosa/fructosa y de la concentración de ácido málico (MIURA One enological analyzer, TDI Barcelona). A lo largo del proceso de fermenta- ción, se tomaron 10 muestras (desde mosto hasta vino embotellado) que se almacenaron a -80 °C hasta el análisis de su perfil fenólico. Determinacióndel perfil fenólicode uva y vino por UHPLC-QqQ-MS/MS La extracción de los compuestos fenólicos del hollejo y de las semi- llas se realizó mediante extracción sólido-líquido (SLE) con una mezcla de metanol/agua Milli-Q/ácido fórmico (79:20:1, v/v/v). La caracterización del perfil fenólico de los clones VN21 y RJ43 (uva y vino) se llevó a cabo mediante un abordaje de metabolómica semi- dirigida por cromatografía líquida de ultra alta resolución acoplada a espec- trometría de masas (UHPLC-QqQ-MS/ MS) (Shimadzu Nexera liquid chroma- tograph, Shimadzu Corporation, Japan) acoplado a AB Sciex 3200QTRAP mass spectrometer, Sciex, USA). Los compuestos fenólicos se identificaron comparando sus parámetros croma- tográficos y los espectros de masas con patrones comerciales, o bien con datos de la literatura. Análisis estadístico Las comparaciones estadísticas entre los clones de Tempranillo VN21 y RJ43 se evaluaron mediante la prueba t de Student para cada una de las muestras de hollejo, semillas, mostos y vinos. La evolución de los compuestos fenólicos durante el proceso de vinificación, para cada clon de Tempranillo, se evaluó mediante análisis de varianza unidirec- cional (ANOVA) seguido de la prueba b de Tukey (p <0.05). RESULTADOS Caracterización fenotípica Aunque el clon de Tempranillo negro (VN21) brota y florece al mismo tiempo que el clon de referencia RJ43, sus bayas maduran dos semanas antes. No obstante, ambos clones presentan un peso de baya y número de semillas similar (Royo et al., 2021). Tal y como se observa en la Figura 1A, las uvas de Tempranillo negro, muestran un aspecto más oscuro que las bayas del clon de referencia RJ43. Otra caracterís- tica peculiar de las uvas de Tempranillo negro es la ausencia de ceras en su superficie, lo que intensifica su color Figura 1. Detalle de bayas (A) y de semillas (B) del clon de referencia RJ43 y del clon 'Tempranillo negro' (VN21).