REPRODUCCIÓN 30 y en verano respectivamente. Teniendo en cuenta el tipo de hembra receptora, los resultados son muy prometedores en ambas épocas del año. LIMITACIONES, RETOS Y FUTURAS DIANAS DE INVESTIGACIÓN La PIVE todavía presenta importantes problemas científicos que necesitan ser investigados. Uno de los principales son las pérdidas de estos embriones durante la gestación. El porcentaje medio de vacas gestantes después de una transferencia de embriones PIVE es del 40% a los 40 días de gestación, del 35% a los 90 días y del 27% al parto [Ealy, A. et al; 2019]. Uno de los factores más importantes de estudio es determinar la fertilidad del embrión producido in vitro previamente a su transferencia en la hembra receptora. La IETS, en su manual, ha descrito características morfológicas para clasificar la calidad de los embriones según la apariencia de sus blastómeros, la forma del blastocele, el grosor de la Zona Pelúcida, el estadio del embrión según los días de desarrollo, etc. Aunque estas calificaciones son las más utilizadas, se continúan estudiando parámetros más objetivos que la morfología, como serían metabolitos en los medios de cultivo de los embriones, tinciones vitales, genómica de células del embrión, proteómica no invasiva del embrión o de sus medios de cultivo, etc. En la actualidad, se están llevando a cabo numerosas investigaciones sobre este tema tanto para determinar la calidad del embrión como para determinar la calidad del ovocito del cual se producen. Estos estudios en vacuno, además, están sirviendo como modelo para el estudio de ovocitos y embriones humanos por su importancia tan creciente en las técnicas de reproducción asistida [Wrenzycki; 2021]. Otro de los temas que necesita gran refuerzo es la criopreservación de los embriones, imprescindible para su utilización y comercialización. CRIOPRESERVACIÓN EMBRIONARIA La criopreservación es una técnica que tiene por objetivo frenar la actividad biológica de células y/o tejidos mediante su conservación a temperaturas por debajo de los 0°C para hacer un uso futuro. Actualmente, representa una parte importante del manejo reproductivo del ganado bovino como la IA y la transferencia de embriones. Según la IETS (2021), la proporción mundial de embriones congelados producidos in vitro y transferidos en una vaca receptora muestra una tendencia ascendente desde el 2012 (10%) representando el 32.6% del total de transferencias de 2021. Si bien hay un aumento significativo en el uso de embriones congelados, exponer a las células a temperaturas tan bajas puede dar lugar a riesgos como la formación de cristales de agua, originando muerte celular. Para evitar tales efectos se utilizan crioprotectores, moléculas que protegen a las células de los efectos de las temperaturas bajo 0°C y del posterior calentamiento. Su función es competir con las moléculas de agua interfiriendo en la generación de los puentes de hidrógeno, consiguiendo la deshidratación/hidratación parcial de los embriones. Los dos métodos actualmente utilizados para criopreservar embriones son la congelación lenta y la vitrificación. La congelación lenta es un proceso de enfriamiento lento y la descongelación consiste en un calentamiento rápido, que evita de nuevo la formación de cristales y que permite su fácil manejo en granja. La vitrificación es un mecanismo de enfriamiento ultra rápido con el que se consigue la ausencia de formación de cristales. La desvi-
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