SANIDAD 63 toria local en los animales infectados por la bacteria que es evaluable por el veterinario, siendo la prueba más empleada para el diagnóstico de TB en rumiantes domésticos. El empleo de la IDTB ha permitido erradicar la TB bovina en diversos países. En España, algunas Comunidades Autónomas también han podido alcanzar el estatus de oficialmente indemne, como es el caso de Canarias, Cataluña, Galicia, Islas Baleares, Asturias, Murcia o País Vasco (MAPA 2023). A esta situación también ha contribuido en gran medida el empleo de la prueba de IFN-γ de forma combinada con la IDTB, ya que la utilización conjunta de ambas técnicas permite maximizar la detección de animales infectados. Sin embargo, el diagnóstico de la TB es difícil, debido fundamentalmente a la compleja respuesta inmunitaria que se desarrolla tras la infección, a los fenómenos de latencia y enfermedad, que no están bien caracterizados en animales, y a las co-infecciones con otras micobacterias. Estos y otros factores pueden afectar al rendimiento de las técnicas diagnósticas, las cuales son a su vez sensibles a variaciones en los procedimientos, lo que exige una formación previa que garantice que se realizan e interpretan adecuadamente (Bezos et al ., 2014; Crozet et al ., 2019). Esta situación conlleva que la mejora del diagnóstico de TB sea una de las líneas de investigación prioritaria y en la que más estudios se están realizando, suponiendo un verdadero desafío por las dificultades anteriormente mencionadas. Gran parte de las investigaciones realizadas hasta la fecha han estado enfocadas a la evaluación y mejora del funcionamiento de las técnicas oficiales anteriormente descritas, ya sea para definir su rendimiento en diferentes situaciones epidemiológicas o para valorar el efecto de posibles modificaciones técnicas en este. En este sentido, se han evaluado antígenos más específicos que podrían ser una alternativa a la tuberculina oficial en el futuro, el efecto que tiene el punto de inoculación en el resultado de la IDTB o el efecto que tiene el tiempo transcurrido entre la toma de muestras de sangre y su estimulación posterior en la prueba de IFN-γ. Todos estos estudios hanpermitidomejoras de los protocolos y del rendimiento de las pruebas oficiales de diagnóstico (Casal et al ., 2015; de Lisle et al ., 2017; Middleton et al ., 2021). Más allá de mejorar lo que está disponible, otros estudios se han centrado en desarrollar técnicas nuevas oplataformas diagnósticas quepudieran ser un complemento de las pruebas oficiales o incluso sustituirlas si el rendimiento demostrado fuese el adecuado, lo que permitiría ampliar el abanico de herramientas y estrategias diagnósticas para lograr la erradicación de la enfermedad en un futuro. Precisamente en algunas de estas técnicas surgidas o evaluadas en los últimos años queremos centrar el presente artículo. NUEVAS TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO El conocimiento de la compleja respuesta inmunitaria frente a la TB y su relación con el diagnóstico ha sido la piedra angular de multitud de trabajos científicos debido a su aplicación directa en los programas de erradicación de la TB bovina. Para lograr que las pruebas tengan una precisión máxima en la diversidad de contextos en los que se encuentran nuestras explotaciones, es necesario mejorar nuestro conocimiento acerca de la respuesta inmunitaria del huésped e investigar en nuevas metodologías que nos permitan una óptima diferenciación de los animales infectados y no infectados. • Técnicas de detección de anticuerpos Las técnicas basadas en la detección de anticuerpos específicos (respuesta inmune de base humoral) frente a antígenos de lasmicobacterias tuberculosas, emergieron como una herramienta complementaria en el diagnóstico de TB bovina. Es necesario remarcar que, por norma general y a diferencia de lo que sucede con la respuesta de base celular, la respuesta inmune de base humoral frente a la TB no es intensa en la fase inicial de la enfermedad, alcanzándose niveles elevados de anticuerpos en fases más avanzadas (Pollock & Neill, 2002) (figura 1). En principio, las técnicas de detección de anticuerpos no permitirían un diagnóstico precoz de la TB y, por esta razón, actualmente no han sido contempladas como una prueba oficial en los programas de erradicación. Sin embargo, a medida que nuestro conocimiento sobre la respuesta inmunitaria frente a la TB se sigue ampliando y las técnicas de detección de anticuerpos van mejorando, estas podrían tener gran potencial en el futuro para determinadas situaciones específicas como por ejemplo, ante la presencia de animales en estados avanzados de infección y/o con la inmunidad celular alterada (comúnmente conocidos como anérgicos), que no responderían convenientemente a las pruebas diagnósticas oficiales como la IDTB o la prueba de IFN-γ (Bezos et al ., 2018). El diagnóstico de base humoral de la TB permite detectar anticuerpos específicos frente a algunas de las proteínas micobacterianas más reactivas como ESAT-6, CFP-10, MPB83 o MPB70 (Bezos et al ., 2014; Wiker, 2009). En esta línea, existe un gran interés por la P22, un complejo proteico altamente específico obtenido a partir de la inmunopurificación de la PPD bovina y que incluye las cuatro dianas anteriormente mencionadas (InfantesLorenzo et al ., 2017). Este complejo ha sido testado experimentalmente en el diagnóstico humoral de TB tanto en bovino como en otros rumiantes domésticos (Infantes-Lorenzo et al ., 2019) y otras especies animales domés-
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