SANIDAD VEGETAL 52 alivio la clorosis férrica en plantas de sorgo, trigo y girasol (Raya-Díaz et al., 2017; Sánchez-Rodríguez et al., 2016). Sin embargo, no hay estudios sobre los mecanismos por los que los HE mejoran la adquisición de Fe por las plantas. En este trabajo, se han estudiado los mecanismos directos e indirectos que utilizan los HE para aliviar la clorosis férrica en plantas de pepino y melón. MATERIAL Y MÉTODOS Cepas fúngicas y preparación del inóculo. En los ensayos se utilizaron dos cepas de B. bassiana (EABb 04/01-Tip y EABb 01/33-Su) y una cepa de M. brunneum (EAMa 01/58Su) de la colección de cultivos de la Unidad de Entomología Agrícola del Departamento de Agronomía de la Universidad de Córdoba (España) con Códigos de Acceso a la Colección Española de Cultivos Tipo 20744, 21149 y 20764, respectivamente. La colonización endofítica transitoria y temporal de plantas de melón se ha demostrado previamente mediante la aplicación foliar de estas cepas (Garrido-Jurado et al., 2017; ResquínRomero et al., 2016). Para proporcionar inóculo para los experimentos, las tres cepas se sub-cultivaron a partir de cultivos almacenados en patata dextrosa agar (PDA) en placas de Petri y se cultivaron durante 15 días a 25 °C en la oscuridad. Estudio in vitro de la biodisponibilidad de Fe mediante la producción de sideróforos. El estudio in vitro se realizó para estudiar las capacidades de las distintas cepas de hongos para desmineralizar Fe. Antes del ensayo, las cepas se cultivaron en medio de agar dextrosa de patata (PDA) para obtener micelio de cuatro días de edad. Este ensayo se repitió dos veces con cuatro réplicas biológicas por cepa. Seguimos unmétodo simplificado (Srimathi & Suji, 2018) del ensayo químico universal para la detección de sideróforos (Schwyn & Neilands, 1987). Discos 6mmde diámetro demicelio de cada cepa se cortaron de colonias en crecimiento activo (4 d) y se colocaron en el centro de placas de Petri (9 cm) que contenían medio de agar Cromo Sulfonato de Azurol (CAS). Las placas se incubaron a 26 (±2) °C en la oscuridad durante 10 días (Barra-Bucarei et al., 2020). Diariamente, a partir de los 3 y hasta 10 días después de la inoculación (dpi), se midió tanto el diámetro de la colonia y el área de halo amarillo/naranja que la rodeaba, el tamaño del área de color naranja era indicativo de la cantidad de sideróforos producidos (Andrews et al., 2016; BarraBucarei et al., 2020). Estudios de biodisponibilidad de Fe en plantas y suelo. Para evaluar la adquisición de Fe en plantas, se utilizó un diseño completamente aleatorizado con 3 tratamientos (3 cepas aplicadas por empapado del suelo), y su respectivo control, con 6 réplicas (plantas) por tratamiento. Semilla certificada de melón ( Cucumis melo L. cv. Galia), con una desinfección superficial (GarridoJurado et al., 2017), fue sembrada en sustrato en macetas de 500 ml, tanto las macetas como el sustrato fueron debidamente esterilizados. La preparación del inóculo se llevó a cabo raspando los conidios de las placas de Petri en una solución estéril de 0,1% Tween 80, seguido de sonicación durante 5 minutos para homogeneizar el inóculo y filtración a través de gasa para eliminar el micelio. Con ayuda de una cámara de Malassezse estimó la concentración Plantas de pepino.
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