HC356 - horticultura
FERTILIZACIÓN Figura 2. Esquema del protocolo realizado para la determinación de la actividad de la enzima PAL. 60 A los 21 días tras la aplicación se tomaron 24 hojas al azar por tra- tamiento y repetición, obteniendo finalmente una muestra homogénea de las distintas tesis o tratamientos realizados. Dichas muestras fue- ron transportadas en frío hasta el Consejo Superior de Investigaciones Científicas de Sevilla (CSIC)-Instituto de la Grasa donde, tras ser recepcio- nadas, se mantuvieron congeladas a -20°C hasta su análisis. De cada muestra se utilizaron 4 g (por duplicado) para la obtención del extracto enzimático (Figura 1), realizándose cuatro medidas de cada uno de ellos. Los resultados se han expresado como la media aritmética ± su desviación estándar en las distintas determinaciones. Para la correcta determinación de dicha actividad enzimática lo primero que se necesita es la obtención de extractos que contengan las enzimas en su forma nativa, evitando las alte- raciones de esta durante el proceso extractivo. Para ello, se ha utilizado una solución tampón, al pH adecuado, y se han mantenido las muestras y reactivos a baja temperatura (baño de hielo y/o nitrógeno líquido) durante todas las etapas de obtención y puri- ficación de los extractos. Una vez obtenidos los extractos corres- pondientes el equipo de investigadores del CSIC siguió el protocolo que se describe a continuación (Figura 2) y que consiste en poner en contacto la enzima presente en el extracto con un sustrato específico, determinando a continuación en el espectrofotóme- tro y a la longitud de onda específica para cada reacción, el incremento o disminución de absorbancia que se produce como consecuencia de la acción de la enzima sobre el sustrato. Las unidades de la actividad de la enzima PAL se calculan en función de dichos cambios de absorbancia referidos a 1 g de material vegetal y por minuto. RESULTADOS Y DISCUSIÓN La acción del producto Brotomax como elicitor ha sido demostrada en diversas especies de interés agrícola. En los cítricos, es bien conocida su acción estimulante en la biosíntesis de flavanonas y flavonas, así como de la expresión de la fitoalexina escoparona en frutos infectados en tangelo Nova, produciéndose como consecuencia el incremento de resistencia frente al ataque por Phytophtora . En olivo, ha quedado establecida su influencia sobre la síntesis de compuestos fenó- licos que incrementan el potencial antioxidante y antifúngico en diferen- tes variedades. En algodón, aumenta el contenido fenólico, clorofilas y produc- ción de etileno, los cuales tienen una repercusión directa en el incremento de los mecanismos de defensa natu- ral de las plantas de algodón frente a F. oxysporum . En viña, aumenta el contenido total de polifenoles en los diferentes órganos, así como la reducción de la obstrucción de vasos xilemáticos en los nuevos tallos y raíces
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